Produktoj

Ni evoluigis novan malgrandan interferan RNA (siRNA) liveran sistemon uzante ternaran komplekson kun polietilenimino (PEI) kaj γ-poliglutama acido (γ-PGA), kiuj montris silentigan efikon kaj neniun citotoksecon.La binaraj kompleksoj de siRNA kun PEI estis proksimume 73-102 nm en partiklograndeco kaj 45-52 mV en ζ-potencialo.La silentiga efiko de siRNA/PEI-kompleksoj pliiĝis kun pliiĝo de PEI, kaj siRNA/PEI-kompleksoj kun ŝargoproporcio pli granda ol 16 montris signifan luciferaz-knokaŭton en musa kojlokarcinoma ĉellinio regule esprimanta luciferazon (Colon26/Luc-ĉeloj).Tamen, forta citotokseco kaj sangaglutino estis observitaj en la siRNA/Lipofectamine-komplekso kaj siRNA/PEI16-komplekso.Reŝargi katjonajn kompleksojn kun anjona kunmetaĵo estis raportita esti promesplena metodo por venkado de tiuj tokseco.Ni do preparis ternarajn kompleksojn de siRNA kun PEI (ŝarĝa proporcio 16) per aldono de γ-PGA por redukti citotoksecon kaj liveri siRNA.Kiel atendite, la citotokseco de la ternaraj kompleksoj malpliiĝis kun pliiĝo de γ-PGA-enhavo, kiu malpliigis la ζ-potencialon de la kompleksoj.Forta silentiga efiko komparebla al siRNA/Lipofectamine komplekso estis malkovrita en ternaraj kompleksoj inkluzive de γ-PGA kun anjona surfacŝargo.La alta enkadrigo de ternaraj kompleksoj en Colon26/Luc-ĉelojn estis konfirmita kun fluoreskecmikrokopio.Atinginte knokaŭton de eksogene transfektita geno, la kapablo de la komplekso por peri malkonstruon de endogena mastruma geno, gliceraldehida 3-fosfata dehidrogenazo (GAPDH), estis taksita en B16-F10-ĉeloj.La ternara komplekso (siRNA/PEI16/γ-PGA12-komplekso) elmontris signifan GAPDH-knokaŭtan efikon.Tiel, ni evoluigis utilan siRNA-liversistemon.