Produktoj

Simile al aliaj pozitiv-fadenaj RNA-virusoj, tombusvirusoj estas reproduktitaj per la membran-ligita virusreplikazokomplekso (VRC).La VRC konsistas el la p92 virus-kodigita RNA-dependa RNA polimerazo (RdRp), la virusa p33 RNA-ŝaperono, kaj pluraj ko-elektitaj mastroproteinoj.Por iĝi funkcia RdRp post ĝia traduko, la p92-reproduktadproteino devus esti integrigita en la VRC, sekvita per sia aktivigo.Ni antaŭe montris en senĉela gista ekstrakto-bazita analizo, ke la aktivigo de la Tomato-arbusta stuntviruso (TBSV) RdRp postulas solveblan gastigan faktoron(j).En ĉi tiu artikolo, ni identigas la ĉelan varmoŝokproteinon 70 (Hsp70) kiel la kooptita mastro-faktoro necesa por la aktivigo de N-fina stumpigita rekombina TBSV RdRp.Krome, malgrand-molekule-bazita blokado de Hsp70-funkcio malhelpas RNA-sintezon de la tombusviruso RdRp en vitro.Krome, ni montras, ke neŭtralaj fosfolipidoj, nome fosfatidiletanolamino (PE) kaj fosfatidilkolino (PC), plibonigas RdRp-aktivigon en vitro.En kontrasto, fosfatidilglicerolo (PG) montras fortan kaj dominan inhibician efikon sur en vitro RdRp-aktivigo.Ni ankaŭ pruvas, ke PE kaj PC stimulas interagadon de RdRp-virusa plus-fadena RNA [(+)RNA], dum PG malhelpas la ligon de la virusa RNA al la RdRp.Surbaze de la stimulaj kontraŭ inhibiciaj roloj de diversaj fosfolipidoj en tombusvirusa RdRp-aktivigo, ni proponas ke la lipidkonsisto de celitaj subĉelaj membranoj povus esti utiligita de tombusvirusoj por reguligi novan VRC-asembleon dum la kurso de infekto. La virus-kodita RNA-dependa RNA polimerazo. (RdRp), kiu respondecas pri sintezado de la virus-RNA-deveno en sepsaj ĉeloj de pluraj pozitiv-fadenaj RNA-virusoj, estas komence neaktiva.Tiu strategio verŝajne evitos virusan RNA-sintezon en la citosolo kiu rapide kondukus al indukto de RNA-eksigitaj ĉelaj kontraŭvirusaj respondoj.Dum la kunigo de la membran-ligita kopizokomplekso, la virusa RdRp iĝas aktivigita tra nekomplete komprenita procezo kiu igas la RdRp kapabla je RNA-sintezo.Uzante TBSV RdRp, ni montras, ke la kooptita ĉela Hsp70-ŝaperono kaj neŭtralaj fosfolipidoj faciligas RdRp-aktivigon en vitro.En kontrasto, fosfatidilglicerolo (PG) havas dominan inhibician efikon sur en vitra RdRp-aktivigo kaj RdRp-virusa RNA-interagado, sugestante ke la membraneca mikrodomajno ĉirkaŭanta la RdRp tre influas sian kapablon por RNA-sintezo.Tiel, la aktivigo de la virusa RdRp verŝajne dependas de multoblaj mastro-komponentoj en sepsaj ĉeloj.