Produktoj

LecA (PA-IL) estas citotoksa lektino kaj adhesino produktitaj de Pseudomonas aeruginosa kiu ligas hidrofobajn galaktozidojn kun alta specifeco kaj afineco.Uzante lecA-egfp-tradukan fuzion kaj imunblotan analizon de la biofilma eksterĉela matrico, ni montras, ke lecA estas esprimita en biofilm-kreskigitaj ĉeloj.En senmovaj biofilmanalizoj sur kaj polistireno kaj rustorezista ŝtalo, biofilmprofundo kaj surfacpriraportado estis reduktitaj per mutacio de lecA kaj plifortigitaj en la LecA-troproduktanta trostreĉiĝo PAO-P47.Biofilma surfacpriraportado de la gepatra trostreĉiĝo, PAO-P47 sed ne la lecA-mutaciulo sur ŝtalkuponoj ankaŭ estis malhelpita per kresko en la ĉeesto de aŭ isopropil-beta-D-thiogalactoside (IPTG) aŭ p-nitrofenil-alfa-D-galaktozido ( NPG).Krome, maturaj sovaĝ-specaj biofilmoj formitaj en la foresto de tiuj hidrofobaj galaktozidoj povus esti disigitaj per la aldono de IPTG.En kontrasto, aldono de p-nitrofenil-alfa-L-fukozo (NPF) kiu havas altan afinecon por la P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n havis neniun efikon al biofilmformacio aŭ disvastigo.Planktona kresko de P. aeruginosa PAO1 estis netuŝita de la ĉeesto de IPTG, NPG aŭ NPF, nek la trostreĉiĝo povis utiligi tiujn sukerojn kiel karbonfontojn, sugestante ke la observitaj efikoj al biofilmformado ŝuldiĝis al la konkurenciva inhibicio de LecA-ligando. ligado.Similaj rezultoj ankaŭ estis akiritaj por biofilmoj kultivitaj sub dinamikaj flukondiĉoj sur ŝtalkuponoj, sugestante ke LecA kontribuas al P. aeruginosa biofilmarkitekturo sub malsamaj medikondiĉoj.

Alfa-L-fukozidazo (EC 3.2.1.51) kapabla liberigi la t-fukosil-restaĵon de la flankĉeno de ksiloglucan-oligosakaridoj estis detektita en la folioj de Arabidopsis plantoj.Krome, alfa-L-fukosidase kun simila substratspecifeco estis purigita de brasiko (Brassica oleracea) folioj por igi ununuran bandon sur SDS-PAGE.Du peptidsekvencoj estis akiritaj de tiu proteina grupo, kaj ili estis uzitaj por identigi Arabidopsis-genon kodantan por alfa-fukozidazo kiun ni proponas nomi AtFXG1.Krome, Arabidopsis geno kun homologio kun konataj alfa-L-fucosidases ankaŭ estis trovita, kaj ni proponis nomi ĝin kiel AtFUC1.Kaj AtFXG1 kaj ATFUC1 estis heterologe esprimitaj en Pichia pastoris ĉeloj kaj la alfa-L-fucosidase-agadoj sekreciitaj al la kulturmedio.La alfa-L-fukosidase ĉifrita fare de AtFXG1 estis aktiva kontraŭ la oligosakaridoj de xyloglucan XXFG same kiel kontraŭ 2'-fukosil-laktitol sed ne kontraŭ p-nitrofenil-alfa-L-fukopiranozido.Tamen, la AtFUC1 heterologe esprimita estis aktiva nur kontraŭ 2'-fukosil-lactitol.Tiel, la unua devas esti rilatita al xyloglucan metabolo.