Produktoj

Monogalaktopiranosidoj de fluoreskein kaj fluoreskeinmetilestero: sintezo, enzimeca hidrolizo de biotnylateita β-galaktosidase, kaj persistemo de traduka difuzkoeficiento

Fluoresceinmonoglikozidoj (d-galaktopiranozido (FMG) kaj d-glukopiranozido) kaj ilia metilestero (MFMG) estis preparitaj de acetobromoglukozo/galaktozo kaj fluoresceinmetilestero en bonaj rendimentoj.Enzimaj hidrolizaj eksperimentoj (uzante biotinilateitan β-galaktosidase) de la galaktoderivaĵoj estis faritaj kaj kinetaj parametroj estis kalkulitaj.15-20-obla pliiĝo de la fluoreskeca intenseco estis observita dum la hidrolizo.Linia pliiĝo de fluoreskeco estis notita en mallonga tempo kaj malalta koncentriĝo de substrato, igante tiujn kunmetaĵojn utilaj kaj sentemaj enketoj por galaktosidases.La grandeco de la Michaelis-Menten-konstanto (Km) valoro por MFMG estas pli alta ol tiu de FMG sugestante eblan konformigan ŝanĝon de la fluorogena substrato.Km-valoro por biotinilateita β-Gal kun FMG estas pli malalta ol tiu por la indiĝena enzimo.Tiu observado indikas pli altan substratafinecon de la biotinilateita enzimo en komparo al la indiĝena enzimo.Translaciaj difuzkoeficientoj estis mezuritaj, por kaj fluorogenaj substratoj kaj ambaŭ la produktoj, utiligante fluoreskecan korelacian spektroskopion.Translaciaj difuzkoeficientoj por fluorogenaj substratoj kaj la enzimecaj hidrolizaj produktoj estis mezuritaj kiel similaj, en la intervalo de 3.5-4.5 × 10−10 m2 s−1.Tiel plibonigo aŭ malfruo de la enzimeca kinetiko pro diferenco en traduka moviĝeblo de substrato kaj produkto ne estas tiel ŝajna.